携帯ゲーム機?ニンテンドーDSのゲームソフトとして販売され、シリーズ累計730万本を突破した人気推理ゲームの映画化。声優に大泉洋、堀北真希、相武紗季、渡部篤郎ら豪華キャストが揃う。ある日、レイトンのもとに教え子のオペラ歌手?カトレーンからオペラのチケットが同封された手紙が届く。「1年前に亡くなった友人のミリーナが、『永遠の命を手に入れた』と言って現れた」という相談を受けたレイトンは、助手のルークとレミとともに、事件の謎を解くためオペラ劇場へと向かう。
